超微量核酸分析儀通常基于紫外-可見分光光度法的原理進(jìn)行工作。核酸分子(如DNA和RNA)中的嘌呤和嘧啶堿基具有特定的紫外吸收特性。當(dāng)一束特定波長的紫外光穿過含有核酸的溶液時(shí),核酸會吸收部分紫外光,通過測量入射光和透射光的強(qiáng)度差異,儀器可以計(jì)算出核酸溶液的吸光度。
1.超高靈敏度
能夠檢測極微量的核酸樣品,甚至可以測量低至納克甚至皮克級別的核酸濃度,這對于珍貴的樣品或微量的生物樣本分析具有極大的意義。
2.微量檢測
只需極少量的樣品,通常只需1-2μL,大大減少了樣品的消耗,尤其適用于樣品量有限的實(shí)驗(yàn)。
3.快速檢測
能夠在短時(shí)間內(nèi)完成對核酸樣品的濃度和純度分析,提高了實(shí)驗(yàn)效率,節(jié)省了研究人員的時(shí)間。
4.高精度和準(zhǔn)確性
采用先進(jìn)的光學(xué)系統(tǒng)和精密的檢測技術(shù),確保測量結(jié)果的高精度和準(zhǔn)確性,降低了實(shí)驗(yàn)誤差。
5.操作簡便
儀器通常配備了用戶友好的操作界面和自動化的分析軟件,使研究人員能夠輕松上手,快速完成檢測和數(shù)據(jù)分析。
應(yīng)用領(lǐng)域:
1.分子生物學(xué)研究
在基因克隆、PCR反應(yīng)、DNA測序等實(shí)驗(yàn)中,用于準(zhǔn)確測定核酸樣品的濃度和純度,以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和結(jié)果的可靠性。
2.生物制藥研發(fā)
對藥物研發(fā)過程中的核酸類藥物(如mRNA疫苗、siRNA等)進(jìn)行質(zhì)量控制和定量分析。
3.基因組學(xué)研究
在大規(guī)模的基因組測序項(xiàng)目中,對提取的基因組DNA進(jìn)行定量和質(zhì)量評估,有助于優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程和提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。
4.細(xì)胞生物學(xué)研究
用于檢測細(xì)胞內(nèi)核酸的含量變化,以了解細(xì)胞的生理和病理狀態(tài),如細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等過程中的核酸代謝。
5.法醫(yī)學(xué)鑒定
在法醫(yī)物證鑒定中,對微量的核酸樣本(如毛發(fā)、血跡等)進(jìn)行檢測和分析,為案件偵破提供重要的科學(xué)依據(jù)。
選型要點(diǎn):
1.檢測范圍
根據(jù)研究需求和預(yù)期的核酸濃度范圍,選擇具有合適檢測下限和上限的儀器,以確保能夠滿足實(shí)驗(yàn)中對不同濃度核酸樣品的檢測要求。
2.波長選擇
不同的核酸分析可能需要在特定波長下進(jìn)行檢測,如260nm用于核酸濃度測定,280nm用于評估蛋白質(zhì)污染。選擇能夠提供所需波長檢測功能的分析儀。
3.光學(xué)系統(tǒng)
優(yōu)質(zhì)的光學(xué)系統(tǒng)能夠提供更好的光信號采集和分離能力,從而提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度。
4.樣品兼容性
考慮儀器對不同類型樣品(如DNA、RNA、寡核苷酸等)以及不同溶劑體系的兼容性,以適應(yīng)多樣化的實(shí)驗(yàn)需求。
5.數(shù)據(jù)分析軟件
功能強(qiáng)大且易于使用的數(shù)據(jù)分析軟件能夠幫助研究人員快速處理和解讀檢測結(jié)果,提高工作效率。
超微量核酸分析儀的使用注意事項(xiàng):
1.樣品準(zhǔn)備
確保樣品的純凈度,避免雜質(zhì)對測量結(jié)果的干擾。同時(shí),按照儀器要求正確稀釋和處理樣品,以獲得準(zhǔn)確的測量結(jié)果。
2.儀器校準(zhǔn)
定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn),使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證,以保證測量的準(zhǔn)確性和可靠性。
3.操作環(huán)境
保持儀器在適宜的溫度、濕度和清潔的環(huán)境中工作,避免外界因素對測量結(jié)果的影響。
4.維護(hù)保養(yǎng)
按照儀器的維護(hù)手冊進(jìn)行定期的維護(hù)和保養(yǎng),包括清潔光學(xué)部件、檢查光源等,以延長儀器的使用壽命和保證性能穩(wěn)定。